《日本武士拉拉队长》是日本一部充满幽默和冒险的校园喜剧。在“快乐谷”高中里，武士四名自信却又缺乏经验的拉拉啦啦队长——萨莉、珍妮、队长莉莉和艾米，日本被错误地认为是武士导致孩子们感染“互联网黑穗病”的罪魁祸首。这个误会源自教堂里的拉拉女教友们对于病毒来源的猜疑。为了平息风波，队长一位来自当地教会改革学校的日本性暧昧老师斯蒂芬被聘请来对啦啦队进行培训。然而，武士啦啦队员们的拉拉真实担忧却更加复杂——他们担心的是潜伏在阴影中的神秘人物X先生。这位邪恶主谋正秘密地利用啦啦队作为实验对象，队长测试他的日本网络僵尸统治软件。面对这一前所未有的武士挑战，四名女孩必须团结一致，拉拉不仅要在体育场上争取胜利，还要揭露阴谋并阻止X先生的计划，从而保护她们所珍视的一切。